溶血性鏈球菌A群(GAS)熒光定量PCR試劑盒是一種常用于檢測和檢驗基因的試劑盒,它通過PCR技術,利用熒光信號來檢測靶序列的存在和數量。
溶血性鏈球菌A群(GAS)熒光定量PCR試劑盒具備以下幾個特點:
1. 可以檢測非常小的DNA片段,也可以檢測微量的DNA,因此具有高靈敏度的特點。
2. 具有高擴增效率,可以在短時間內擴增出大量的目標DNA片段。
3. 可以精準地分析和定量PCR反應體系中的DNA。它的分辨率較高,能夠有效地區分靶序列和非靶序列,并且具有較低的誤差率。
4. 使用簡單方便,只需簡單設置PCR反應條件即可,不需要使用復雜的設備和化學試劑。
5. 操作簡單易學,不需要復雜的實驗步驟和技能。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融少于 7 次,有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀?!?
1.1 DNA 提取
1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒溫處理 10min,13,000 rpm 離心 5min,取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;
2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
2. 檢測方法的局限性
a. 樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
b. 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;
c. 陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;
d. 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;
f. 試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;
g. 本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
1.1 結果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數增長曲線。
可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現典型擴增曲線的樣本建議重復試驗,重復試驗結果出現 Ct 值≤35.0 和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。
陰性:樣本檢測結果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。
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