嗜肺巴斯德桿菌PCR試劑盒
產品內容:
成分 | 包裝 |
2×Taq PCR Master Mix | 600ul |
超純水(ddH2O) | 1ml |
嗜肺巴斯德桿菌 PCR 引物混合液 | 60ul |
嗜肺巴斯德桿菌 PCR 陽性對照(1×10E5 拷貝/μL) | 50ul |
使用手冊 | 1份 |
注:為避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供專一的核酸片段作為陽性對照。
儲存條件及有效期:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。
自備試劑:
樣品 DNA
用自選方法提取純化樣品 DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸-提取試劑盒兼容。建議使用細菌基因組 DNA-提取試劑盒提取DNA。
應用范圍:
常規PCR;T/A克隆;菌落PCR鑒定。
PCR過程:
1.變性
當反應混合物加熱0.5至2分鐘至94°C時,發生變性。
由于 DNA 兩條鏈之間的氫鍵斷裂,形成單鏈DNA。
單條 DNA鏈現在充當合成其他 DNA鏈的模板。
2.退火
持續約20至40秒,反應溫度降至54至60℃。
在這種情況下,引物附著在模板 DNA的互補序列上。
引物序列是20-30個堿基長的單鏈 DNA或RNA片段。
它們充當 DNA生產的前體。
有兩個引物-正向引物和反向引物一一兩條分離的鏈以相反的方向延伸。
3.延伸
在此階段溫度升高至72至80攝氏度之間。
Taq聚合酶將堿基固定到引物的3'未端。結果,DNA從5'延伸至3'。
Taq聚合酶可以承受極-高的溫度。結果產生雙鏈DNA分子。
為了在短時間內獲得多個感興趣的 DNA序列,這三個過程需要進行20-40次。
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